二氯化钴诱导唾液腺腺样囊性癌ACC-M细胞自噬的实验研究
尹长伟 ,吴海威, 黄圣运 ,马猛, 陈占伟, 张东升,
2015 (6):
491-496.
摘要
(
352 )
目的 :研究二氯化钴(CoCl2)对唾液腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖和自噬的影响。方法 :应用MTT法对ACC-M细胞进行细胞活力测验,以检测CoCl2对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察自噬体形成;双免疫荧光标记、实时定量PCR(RT-PCR)及Western 蛋白免疫印迹检测自噬相关基因HIF-1α/BNIP3通路相关基因、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)及Beclin 1的表达。采用SPSS15.0软件包对数据进行双尾 t检验。结果 :CoCl2可降低ACC-M细胞的活性,同时诱导自噬体的形成;透射电镜下,实验组细胞内可见自噬体样的双层膜结构;RT-PCR及Western 蛋白免疫印迹检测显示,CoCl2可使HIF-1α/BNIP3信号通路和自噬相关蛋白的表达显著提高。结论 :CoCl2可模拟低氧环境,从而诱导ACC-M细胞产生自噬,HIF-1α/BNIP3信号通路在这一过程中扮演着重要角色。
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