摘要： 目的：B7-H3作为B7家族的最新成员，其受体在活化的T细胞表面可被诱导表达，B7-H3对CD4+和CD8+细胞的生成均具有增加作用，并可选择性增加IFN-γ的生成。为将B7-H3基因转染入舌鳞癌细胞Tca8113中制备瘤苗，克隆人共刺激分子B7-H3基因，构建其真核表达载体，并检测B7-H3基因在Tca8113中的表达。方法：从淋巴细胞中提取RNA，用RT-PCR方法将B7-H3的编码序列cDNA扩增。然后将该基因的编码序列插入真核荧光蛋白载体pEGFP-C1中，构建成最终的表达载体pEGFP-C1-B7-H3。运用脂质体方法将pEGFP-C1-B7-H3转染Tca8113细胞，转染24h后，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达，RT-PCR检测B7-H3在该细胞中的表达。结果：从淋巴细胞中提取的RNA质量较好，经RT-PCR扩增出目的基因B7-H3，其全长大小为951bp。 测序鉴定，该序列与GenBank中序列相同。转染pEGFP-C1-B7-H3载体的靶细胞Tca8113中，荧光显微镜下可见其表达绿色荧光蛋白，RT-PCR方法检测到目的基因B7-H3的一个215bp大小的cDNA扩增产物。结论：酶切及RT-PCR证实成功构建人B7-H3的真核表达载体pEGFP-C1-B7-H3，将该载体转染到Tca8113中，RT-PCR鉴定B7-H3基因在该细胞中表达。