中国口腔颌面外科杂志 ›› 2013, Vol. 11 ›› Issue (2): 91-96.
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陈之锋1，吕标2，郑超群3，胡逢春1，陶谦1
摘要： 目的：转染外源性人端粒酶反转录酶（human telomerase reverse transcriptase, hTERT）基因建立永生化口腔黏膜上皮（oral mucosal epithelial, OME）细胞株。方法：利用反转录病毒载体将外源性hTERT基因转入OME细胞，G418筛选出抗性细胞克隆后，进行免疫细胞化学（immunocytochemistry，ICC）鉴定细胞来源、细胞形态学观察、细胞增殖动力学研究、裸鼠成瘤实验以及hTERT基因和蛋白表达的检测。采用SPSS11.0软件包对数据进行统计学处理。结果：转染细胞与未转染细胞形态非常相似，均呈多边形、多角形，“铺路石”样排列；广谱角蛋白染色阳性，波丝蛋白染色阴性；未转染细胞体外培养36 d后停止生长，群体倍增数（population doublings，PDL）为9，转染细胞增殖活跃，PDL值超过80；RT-PCR和Western 印迹结果均显示，hTERT在转染细胞中稳定表达，而在未转染细胞中不表达。结论：转染外源性hTERT基因的OME细胞呈稳定增殖的永生化状态。
