摘要： 目的：克隆人肿瘤坏死因子配体超家族(tumor necrosis factor superfamily，TNFSF)成员4-1BBL基因，构建其真核表达载体，并检测4-1BBL基因在Tca8113中的表达。方法：从淋巴细胞中提取RNA，用RT-PCR方法将4-1BBL的编码序列cDNA扩增。然后将该基因的编码序列插入真核荧光蛋白载体pEGFP-C1质粒中，构建成最终的表达载体pEGFP-C1-4-1BBL。运用脂质体方法将pEGFP-C1-4-1BBL转染Tca8113细胞，转染24h后，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达，RT-PCR和免疫印迹检测4-1BBL在该细胞中的表达。经G418筛选后，用有限稀释法建立稳定高表达的带有4-1BBL基因的Tca8113细胞系。结果：从淋巴细胞中提取的RNA经RT-PCR扩增出目的基因 4-1BBL,其全长大小为768bp。测序鉴定该序列与GenBank中的序列相同。转染pEGFP-C1-4-1BBL载体的靶细胞Tca8l13中，荧光显微镜下可见其表达绿色荧光蛋白，RT-PCR方法检测到目的基因4-1BBL的768bp大小的cDNA扩增产物。裂解的4-1BBL/Tca8113基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约27.5Kd的特异性条带。结论:转染4-1BBL基因细胞株的建立，为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础。