中国口腔颌面外科杂志 ›› 2007, Vol. 5 ›› Issue (6): 451-455.

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大鼠成骨细胞体外培养、特性鉴定及低氧时VEGF表达的变化

关键,阚娜,刘凤玲   

  • 出版日期:2007-04-12 发布日期:2007-04-12

  • Online:2007-04-12 Published:2007-04-12

摘要: 目的:用酶消化法从Wistar大鼠下颌骨分离和体外培养成骨细胞,观察应用CoCl2处理后,成骨细胞中VEGF的表达变化。方法:取新生24h内Wistar大鼠下颌骨,采用多次酶消化法进行成骨细胞原代培养,经细胞形态学及组织学鉴定,取最佳生长状态的鼠下颌骨成骨细胞,采用CoCl2处理后建立体外成骨细胞低氧模型,以激光共聚焦显微镜观察不同低氧时间的VEGF的表达情况。结果:经大鼠下颌骨培养出的成骨细胞具有成骨细胞的典型生物学行为,富含碱性磷酸酶(ALP)活性,可合成Ⅰ型胶原等;应用CoCl2处理后,对照组细胞可观察到较弱的荧光,随低氧时间的延长,VEGF表达的荧光比值增加,低氧组低氧6 h光密度值明显增加;在低氧9 h时,VEGF的表达强度最高,达到峰值,随后降至正常水平。结论:采用新生大鼠下颌骨培养成骨细胞的方法切实可行,可用于口腔医学相关研究;低氧可调节成骨细胞VEGF的表达。