中国口腔颌面外科杂志 ›› 2008, Vol. 6 ›› Issue (1): 48-53.

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实时定量PCR检测Nel样I型分子基因对大鼠骨髓基质细胞成骨相关基因表达的影响

胡镜宙,蒋欣泉,张志愿,等   

  • 出版日期:2008-02-10 发布日期:2008-02-10

  • Online:2008-02-10 Published:2008-02-10

摘要: 目的:研究Nel-like 1型分子(Nell-1)基因对体外培养大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, bMSCs)成骨相关基因表达的影响。方法:取6周龄雄性Fischer 344大鼠胫骨和股骨骨髓体外培养,以腺病毒为载体,进行基因转染,绘制生长曲线并测定转染效率。以转染β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase,LacZ)基因的bMSCs为对照组,转染Nell-1的bMSCs为试验组,用实时定量PCR(real-time PCR)测定成骨相关基因碱性磷酸酶基因(alkaline phosphatase,ALP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(osteopontin,OP)和Sox9的表达。以2-ΔΔCT法计算基因表达的相对比值。结果:随着Nell-1基因转染滴度的增高,细胞增殖速度减慢。基因转染效率随滴度增加而增高。Nell-1基因转染大鼠bMSCs,早期下调、中期和晚期上调ALP的表达,晚期上调OC的表达,整个成骨周期中均上调OP和BSP的表达。结论:Nell-1基因可能通过影响各成骨相关基因的表达而促进大鼠bMSCs的成骨分化。