摘要: 目的:建立hBMP-4 反转录病毒体系,为BMP-4基因治疗在骨组织工程中的应用提供研究平台。方法:应用亚克隆方法构建pLEGFP-hBMP-4真核表达载体,脂质体介导下转染PA317细胞,包装病毒颗粒。收集病毒上清,感染NIH3T3细胞系,测定滴度。以同样方法转染、包装获得了绿色荧光蛋白LEGFP反转录病毒,作为实验对照。将实验组和对照组病毒液分别注射至4只裸鼠肌内,8周后取材,组织学检查,鉴定成骨的效果。结果:成功构建了pLEGFP-hBMP-4载体。转染包装细胞后,获得了较高滴度的LEGFP-hBMP-4和LEGFP反转录病毒颗粒。裸鼠肌内注射后8周,hBMP-4病毒注射部位有新生骨块形成,而EGFP组则未见新生骨块。结论:成功建立了LEGFP-hBMP-4反转录病毒体系,为利用BMP-4基因治疗进行骨修复的研究提供了反转录病毒工具。