中国口腔颌面外科杂志 ›› 2013, Vol. 11 ›› Issue (1): 8-14.

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骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的培养方法及生物学特性鉴定

吴玉琼,江凌勇,张鹏,代庆刚,房兵   

  • 出版日期:2013-02-10 发布日期:2013-02-10

  • Online:2013-02-10 Published:2013-02-10

摘要:

目的:探索骨质疏松大鼠(OVX)骨髓间充质干细胞(BMSCs)的培养方法,进行鉴定并观察其生物学特性。方法:通过去卵巢法构建SD大鼠骨质疏松模型,在OVX组大鼠和假手术组(Sham)大鼠,分别冲取不同部位(肱骨、股骨和胫骨)的骨髓,贴壁法分离纯化BMSCs,并通过MTT法检测其增殖活性,流式细胞仪检测其表面抗原;对BMSCs进行成骨、成脂诱导,并与Sham组BMSCs对比,观察OVX组BMSCs成骨、成脂肪分化的差别。结果:在OVX大鼠,无法培养出股骨中的BMSCs,可培养出胫骨和肱骨的BMSCs,但前者细胞量少,后者量多;与Sham组相比较,成骨诱导后OVX组BMSCs的碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌均较低;成脂诱导后,OVX组BMSCs生成的脂滴数目较多。结论:通过选取肱骨骨髓,加大细胞培养密度,可以成功培养出OVX大鼠的BMSCs,细胞量明显多于其他部位骨髓,可满足实验的样本量要求;大鼠BMSCs(OVX)具有增殖速率低、成骨能力弱、成脂能力强的生物学特性。