摘要： 目的：建立DNA甲基转移酶1（DNMT1）表达稳定抑制的唾液腺腺样囊性癌细胞系ACC-M，探讨DNMT1表达抑制对ACC-M细胞E-cadherin表达的影响。方法：设计靶向干扰DNMT1的shRNA序列，构建携带该序列的慢病毒载体并转导ACC-M细胞，对筛选出的抗性克隆采用RT-PCR、荧光定量PCR、免疫印迹方法分别检测DNMT1 mRNA、蛋白质水平，筛选获得DNMT1表达稳定抑制的ACC-M细胞，并通过甲基化特异性PCR检测E-cadherin基因启动子的甲基化状态，荧光定量PCR检测E-cadherin 的表达情况。采用SPSS11.0软件包对数据进行t检验。结果：筛选获得DNMT1稳定表达抑制的ACC-M细胞，其mRNA、蛋白相对表达水平(0.156±0.008, 0.163±0.013)显著低于空白对照组和空载对照组。进一步检测发现，E-cadherin基因启动子甲基化水平明显降低，E-cadherin mRNA表达水平显著增高，P<0.05。结论：shRNA慢病毒载体介导的RNA干扰能够有效、稳定地抑制ACC-M细胞DNMT1的表达，并降低ACC-M细胞E-cadherin基因启动子的甲基化水平，从而使E-cadherin基因表达增强。