摘要： 目的：口腔鳞状细胞癌特定的干细胞标志物并不清楚，本研究旨在通过微球体培养方式，富集口腔鳞癌干细胞，对其生物学特性进行初步研究。方法：采用DMEM/F12＋bFGF+EGF培养液培养口腔鳞癌细胞，诱导口腔鳞癌干细胞样微球体生长。随后对该微球体的生物学特性进行观察，包括采用10％FBS+DMEM培养法检测其诱导分化能力；采用体外连续克隆法检测该微球体细胞的自我更新能力；采用免疫荧光技术及反转录酶链反应（RT-PCR）检测微球体内干细胞相关的信号分子的表达变化；采用SPSS 15.0软件包对结果进行t检验。结果：在DMEM/F12+bFGF+EGF中培养1周左右，即见典型的干细胞样微球体形成。随着培养时间延长，微球体直径逐渐增大，3周左右可达到 1mm左右，在体外可连续传代，形成新的微球体。微球体在10％FBS+DMEM中迅速贴壁生长，7～10d后完全贴壁，单层样生长。体外连续克隆实验表明，微球体有很强的克隆形成能力和自我更新能力。干细胞相关分子Shh及Gli2在口腔鳞癌微球体中的表达水平显著升高。结论：微球体培养法成功富集了口腔鳞癌中一些具有较强自我更新能力的细胞，为进一步研究口腔鳞癌干细胞的生物学特性提供了一个重要工具。