摘要：

目的：通过大鼠下颌下腺细胞（rat submandibular gland cells, RSMGs）与柞蚕丝素蛋白（antheraea pernyi silk fibroin，ApSF）膜的体外共培养，探讨RSMGs在支架上的形态特征、黏附、增殖及分泌功能。方法：将柞蚕丝素蛋白膜、桑蚕丝素蛋白（bombyx mori silk fibroin，BmSF）膜分别接种SD大鼠的RSMGs进行共培养，并以24孔培养板单独培养的RSMGs作为阴性对照组。免疫细胞化学抗角蛋白抗体（cytokratin 8，CK8）、淀粉酶抗体（amylase）染色鉴定细胞来源；扫描电镜、荧光显微镜观察细胞支架复合生长情况；检测细胞在支架上的黏附率；MTT比色法检测材料上细胞的增殖能力；Amano法测定上清液中淀粉酶含量，检测细胞支架共培养后下颌下腺细胞的功能。采用SPSS13．0软件包对数据进行统计学分析。结果：免疫细胞化学染色观察共培养后的细胞，上皮细胞特异性抗体CK8染色阳性，腺泡上皮细胞特异性抗体Amylase染色阳性。扫描电镜可见，共培养后ApSF膜上细胞增殖活跃，表面呈现出微绒毛等超微结构，并向支架材料伸出伪足。荧光显微镜下可见，随着共培养时间的延长，支架上锚定的种子细胞数量增多，形态规则。2组支架接种细胞1 h后，RSMGs开始附着于支架上且黏附率差异不显著（P>0.05）；4～12 h 2组黏附率逐渐增大，ApSF组较BmSF组更显著（P<0.05）；24 h时，95%细胞黏附于2种材料上，2组差异不显著（P>0.05）。MTT提示，RSMGs与ApSF复合培养3、5 d后增殖迅速，第7天时达到峰值；ApSF组的细胞在第3、5和7天增殖速度与BmSF组差异显著（P<0.05）,2组细胞增殖均与阴性对照组差异显著（P<0.05）。Amano法提示，随着接种后培养时间的延长，2组淀粉酶含量均有不同程度的增加；ApSF组在第3、5、7天时唾液淀粉酶浓度与BmSF组相比有显著差异（P<0.05），2组酶浓度均与阴性对照组差异显著（P<0.05)。结论：RSMGs与ApSF复合培养后，可保持细胞表型、增殖分化能力及分泌功能。ApSF对于RSMGs具有较好的细胞相容性。